圆腹雅罗鱼

染色体

采集地点:天津市,换新水产良种场

测样日期:2007年

取样部位:肾

取样数量:6尾

检测单位:天津市换新水产良种场

实验方法:体内注射小牛血清和秋水仙素短期培养,经低渗、固定、低片,干冻玻片制片,吉姆萨染色。

图片说明:染色体中期核型

性别:雌、雄

染色体数:2n=50

核型方式:2n=18m+22sm+4st+6t

 

mtDNA分析

(1)

采集时间:1981-1985年

样品来源:新疆赛里木湖

取样部位:肌肉组织

样本数:2尾巴

实验技术:PCR扩增

目的基因:mtDNA Cytb

引物信息::L14724:5’ 一G A C T T G A A A A A C C A C C G T T G一 3’

H15149:5 ’一C C T C A GA A G G A T A T T T GT C CTC一3’

扩增条件:

扩增反应总体积为50微升,其中含有50 ng的模板DNA,2.5 U的Taq DNA聚合酶,1×buffer,每种引物浓度分别为0.2 μmol/L,dNTP浓度为100μmol/L,Mg 浓度为1.5 mmol/L。PCR扩增反应在PE PTC一100 热循环仪上进行。反应条件为:95℃ 2 min后进行36个循环的94℃ 30 S、49℃ 30 S、72℃ 1 min。之后,反应于72℃延伸10 min,4℃结束。

扩增片段大小:489bp

图片说明:高体雅罗鱼等三种雅罗鱼mtDNA Cytb扩增结果

参考文献:

胡文革,段子渊,王金富等. 新疆3种雅罗鱼线粒体DNA细胞色素b序列的差异与系统进化 [J]. 动物学杂志, 2005, 40 (3) 6 .

(2)

采集时间:1981-1985年

样品来源: 新疆赛里木湖

取样部位:肌肉

样本数:1尾

实验技术:PCR扩增

目的基因:mtDNA D-loop

引物信息:

P2-U(5’ -TTAACTCCCAC—CCCTGGCT-3’ )

P1-L(5’ –CACGTTCTCGAACCTTCCTT-3’

 

扩增条件:

扩增反应总体积为50 uL,其中含有50 ng的模板DNA,1.6 U的Taq DNA聚合酶,1 X Bufer,每种引物浓度分别为0.2μmol/L,dNTP浓度为100pmol/L,Mg离子浓度为1.5 pmol/L。PCR扩增反应在PE PTC-100 热循环仪上进行。反应程序为:95℃ 2 min;94℃ 30 S,51℃ 30 S,72℃ 1 min 30 S,进行35个循环;最后再72℃延伸10 min,4℃结束。

扩增片段大小:827bp

参考文献:

胡文革,段子渊,王金富等. 新疆3种雅罗鱼线粒体DNA控制区序列的差异和系统进化关系 [J]. 遗传学报, 2004, 31 (9) 6 .

 
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